V（主角）
V 是玩家控制的主角，可选择男性或女性身份，个性、背景和技能树均可自定义。在夜之城的世界中，V 是一位野心勃勃的雇佣兵，目标是在这个危机四伏的城市中留下自己的名号。
强尼·银手（Johnny Silverhand）
由基努·里维斯扮演的传奇摇滚歌手和反企业武装战士。他的数字灵魂被存储在一枚“Relic”芯片中，与你的角色 V 共享大脑空间。强尼拥有强烈的反体制思想，是游戏核心剧情推动者。
帕南·帕尔默（Panam Palmer）
Nomad 出身，曾是阿尔德卡多帮派成员，是一名技术高超的驾驶员和战士。与 V 关系密切，代表了夜之城外游牧部落的生活方式。
朱迪·阿尔瓦雷兹（Judy Alvarez）
夜之城最优秀的“脑舞”编辑师之一，具备高超的技术能力，性格叛逆但忠诚。是 V 在游戏中可以发展深入关系的重要角色。
其他重要角色
| 角色名 | 所属帮派 / 阵营 | 简介 |
|---|---|---|
| 帕南·帕尔默 | 阿拉萨卡叛逃者 / 游牧民阿尔德卡多家族 | 游牧部落战士，性格刚烈，是V的重要盟友之一。 |
| 里弗·沃德 | NCPD（夜之城警局） | 正义感强烈的警探，与V有密切合作。 |
| 克丽儿 | 夜之城赛车组织 | 酒保兼赛车组织者，玩家可参与其赛车任务线。 |
| 德克斯特·德肖恩 | 中间人 | 曾是V任务委托人，事件发展后构成重大剧情转折。 |
| 竹村五郎 | 荒坂企业 | 忠于义理的日本保镖，在剧情中协助V揭露阴谋。 |